Barnsley U21 är en engelsk fotbollsklubb som spelar i Professional Development League 2, den fjärde nivån i det engelska ligasystemet för ungdomslag. Laget är reservlaget till Barnsley FC och spelar sina hemmamatcher på Oakwell Training Ground.

Barnsley U21 är ett relativt framgångsrikt lag och har vunnit Professional Development League 2 två gånger, säsongerna 2016–17 och 2017–18. Laget har också nått finalen i EFL Trophy två gånger, säsongerna 2016–17 och 2017–18.

Några av de mest kända spelarna som har spelat för Barnsley U21 är Mason Mount, Callum Styles och Conor Hourihane.